下单:生物扫描电子显微镜 常见问题

生物扫描电子显微镜

仪器型号: hitachi SU8100,JSM-7500F等


样品要求

送样方式:

①需要您提供的样品:收集细胞/组织取样(新鲜迅速取材),置于1.5ml离心管内,加入2.5%的戊二醛溶液(固定液加满离心管,使样品完全浸没在固定液中),放置于4℃保存,请不要倒弃固定液,一般固定12h后可寄送(务必采用1.5ml离心管寄送)。

②打印填写完整的预约单、送样单和样品一起寄送。

样品取材及固定常用方法:

①细胞类

106以上的细胞,用细胞刮刀刮下来,1500-3000转离心,5-10min,收集细胞于1.5ml或2ml离心管,管底肉眼可见2-3粒大米状样品,如果细胞量很多,把细胞团块用细针尖挑成几个小团块,弃上清,沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液,固定液完全浸没样品,可放置于4°C保存。

②组织类

新鲜取材,取材位置准确,组织大小尽量在1-2mm³,离体取材后请尽快投入4℃预冷的固定液中,固定液完全浸没组织,可放置于4°C保存。

③细菌类

吸取OD0.5-0.8的培养物,离心后弃培养基,收集菌体沉淀于管底黄豆大小,可以用PBS洗1-2次,齐上清,沿管壁缓慢加入4℃预冷的固定液,固定液完全浸没样品,可放置于4°C保存。


测试案例

形貌图



常见问题
  1. 2.5%戊二醛固定液如何配置?

市售25%戊二醛水溶液         10ml

0.2M磷酸盐缓冲液(pH7.0)    50ml

蒸馏水加至                   100ml

  1. 0.2M,pH7.0磷酸缓冲液的配置方法?

A液:Na2HPO4·H2O 31.61g,或者Na2HPO4·7H2O 53.63g,或者Na2HPO4·12H2O 71.64g,加蒸馏水至1000ml

B液:NaH2PO4·H2O 27.6g,或者NaH2PO4·2H2O 31.21g,加蒸馏水至1000ml

0.2M,pH7.0磷酸缓冲液= A液61ml+B液39ml(合起来是100ml)

  1. 为什么要加固定液?

固定液是为了保持细胞、组织的固有形态和结构。


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