原始样本（血清2ml以上、血浆4ml以上、细胞上清20ml以上）；提取好的外泌体干冰送样，不要反复冻融；注意：分离exosome前的样品不能加入任何RNA保护剂。

1. 样品类型：常见的样品类型包括细胞培养上清、血液(血浆或血清)、尿液、体液(如脑脊液、腹水、唾液)等。不同的样品类型可能需要不同的预处理方法。

2. 细胞培养条件：

- 细胞生长状态应良好，无污染。

- 使用无外泌体血清以减少血清外泌体的干扰。

- 确保细胞充分培养至对数生长期以保证充足的外泌体分泌。

3. 血液样品：

- 最好使用新鲜血液，或在采血后立即处理以防止血液凝固或溶血。

- 在采集和处理血液样品时应避免外源性污染。

4. 生物安全：

- 遵守生物安全规定，特别是在处理来自特定病原体或具有传染性的材料时。

- 使用一次性手套和一次性尖端器具以减小交叉污染的风险。

5. 体积和浓度：

- 确保样品具有足够的体积以获得足量的外泌体用于后续实验。

- 样品浓度应足够高，以便在外泌体提取前能够准确评估细胞或组织的外泌体分泌水平。

6. 储存条件：

- 对于无法立即提取处理的样品，应在低温(通常为-80°C)保存，以保持外泌体的活性和稳定性。

- 避免反复冻融，因为这可能会破坏外泌体的结构和功能。

7. 避免污染：

- 尽可能排除非外泌体的囊泡、细胞碎片和蛋白质等杂质。

- 使用.22μm滤膜或预冷的离心管过滤去除可能的微粒污染。

8. 预处理：

- 对样品进行适当的预处理，如离心去除细胞碎片或死细胞。

- 可能需要根据实验目的对样品进行稀释或浓缩。

9. 记录和标记：

- 准确记录样品信息，包括样品类型、收集日期、处理步骤和任何可能影响后续分析的因素。

10. 质量控制：

- 定期检查样品质量，如通过检测外泌体特异性标志物(如CD63、CD81、Alix等)来验证外泌体的纯度和完整性。